產(chǎn)品類別：外周血白細胞的分離
 
產(chǎn)品編號：WBC107705
 
產(chǎn)品名稱：人外周血白細胞分離液KIT 醫(yī)用級 內(nèi)毒素<0.5EU
 
產(chǎn)品規(guī)格：200ml/KIT
 
產(chǎn)品價格：￥1800.00元
 
本品用于分離人外周血白細胞
 
（樣本密度分離液）人外周血白細胞分離液實驗方法
 
【產(chǎn)品規(guī)格】
 
200ml/Kit
 
【產(chǎn)品組成】
 
為方便廣大用戶使用，試劑內(nèi)容如下：
 

	名稱	產(chǎn)品編號	規(guī)格
A	XXXX 動物外周血白細胞分離液		200ml
B	樣本稀釋液（贈品）	2010C1119	200ml
C	清洗液（贈品）	2010X1118	200ml
D	紅細胞裂解液（贈品）	NH4CL2009	100ml
E	說明書		1 份

 
【實驗前準備】
 
適用儀器：最大離心力可達 1200g 的水平轉(zhuǎn)子離心機
 
【檢驗方法】
 
全過程樣本、試劑及實驗環(huán)境均需在 20±2℃的條件下進行。
 
首先取抗凝血，根據(jù)樣本量大小，分以下兩種情況：
 
情況 A：血液樣本量小于 5ml 時，實驗方法如下：
 

• 取一支 15ml 離心管，先加入 5ml 分離液

 

• 用吸管小心吸取血液樣本加于分離液液面上，500-800g，離心 20-30min（注：如改變血液樣本及分離液用量，需相應(yīng)調(diào)整離心力及離心時間，具體離心條件需客戶自行摸索，以達到最佳分離效果。）

 

• 離心后用吸管小心吸取所有環(huán)狀乳白色細胞層（一層或兩層），加入 10 ml 清洗液（產(chǎn)品編號：2010X1118），混勻細胞。250g，離心 10min。重復(fù)洗滌 2-3 次，即得所需白細胞。

 

• 如有紅細胞殘留請使用紅細胞裂解液（產(chǎn)品編號：NH4CL2009）裂解紅細胞，具體操

 
作方法詳見“紅細胞裂解液使用說明”。
 
情況 B：血液樣本量大于等于 5ml 時，實驗方法如下：
 

• 取一支適當?shù)碾x心管，先加入與樣本等量的分離液。

 

• 將血液樣本小心加于分離液之液面上，550-850g（最大離心力可至 1000g），離心

20-30min。（注：根據(jù)血液樣本量確定離心條件，血液量越多，離心力越大，離心
 
時間越長，具體離心條件需客戶自行摸索，以達到最佳分離效果。加入血液樣本后，樣
 
本及分離液總體積不得超過離心管總體積的三分之二）。
 
3. 剩余步驟同“情況 A”中步驟 3 與步驟 4。
 
【注意事項】
 

• 全過程樣本、試劑及實驗環(huán)境均需在 20±2℃的條件下進行。為獲得最佳的實驗結(jié)果，最好在取血 2h 內(nèi)進行實驗，血液存放時間越長，細胞分離效果越差。血液放置超過 6h 后分離效果更差甚至不能達到分離目的。

 

• 本實驗最好不要使用高聚合材質(zhì)（如聚苯乙烯）的塑料制品，應(yīng)使用無靜電、低靜電離心管及未經(jīng)堿處理過后的玻璃制品，因為靜電作用將導(dǎo)致細胞貼壁、堿處理的玻璃表面會變成毛面，影響細胞分離效果。

 

• 分離液用量大于稀釋后血液樣本時，分離效果更佳。

 

• 當血液樣本粘度過高需稀釋時，最優(yōu)稀釋方法：將血液與樣本稀釋液（產(chǎn)品編號：2010C1119）1:1 稀釋混勻備用。注：不當?shù)南♂尫椒〞档图毎寐始盎钚浴Ｈ缪簶颖窘?jīng)過稀釋則分離過程中需適當降低離心力和離心時間。

 

• 如實驗后細胞得率或活性過低，請聯(lián)系技術(shù)支持以尋求幫助。

 
【儲存條件及有效期】
 
常溫保存，有效期 2 年。本品易感染細菌，需無菌條件操作。無菌條件下操作，啟
 
封后置常溫保存。如 4℃保存，本分離液易出現(xiàn)白色結(jié)晶，影響分離效果。
 
【參考值（參考范圍）】
 
本實驗白細胞提取率及純度大于 80%。
 
下表為成年人外周血中各種細胞的數(shù)量及比例，用戶可適當進行參考。
 

	紅細胞		白細胞		血小板
		（4.0-10.0）×109
含量（個/L）	（4.0-5.5）×1012	中性粒細胞	淋巴細胞	單核細胞	（1.0-3.0）×1011
		50%-70%	20%-40%	3%-8%
【相關(guān)實驗技術(shù)方案】

 

• 所獲得白細胞的培養(yǎng)技術(shù)。

 

• 所獲得白細胞的核酸提取技術(shù)。