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    大鼠紅細胞分離液試劑盒
    產品編號:RBC2012RATK
    別名 大鼠紅細胞分離液試劑盒 
    英文名  
    大鼠紅細胞分離液試劑盒
    中文名稱:大鼠紅細胞分離液試劑盒
    中文別名:大鼠紅細胞分離液試劑盒
    產品類別:紅細胞的分離
     
    產品編號:RBC2012RATK
     
    產品名稱:大鼠紅細胞分離液試劑盒
     
    產品規格:200ml/KIT
     
    產品價格:¥500.00元
     
     
    本品用于分離大鼠紅細胞

    “XXXX”動物外周血紅細胞分離液實驗方法
     
    技術文檔編號:TBD0047SOP
     
    【產品規格】
     
    200ml/Kit
     
    【產品組成】
     
    為方便廣大用戶使用,試劑內容如下:
     
      名稱 產品編號 規格
           
    A XXXX 動物外周血紅細胞分離液   200ml
           
    B 樣本稀釋液(贈品) 2010C1119 200ml
           
    C 清洗液(贈品) 2010X1118 200ml
    D 說明書   1 份
           
     
    【實驗前準備】
     
    適用儀器:最大離心力可達 1200g 的水平轉子離心機
     
    【檢驗方法】
     
    全過程樣本、試劑及實驗環境均需在 20±2℃的條件下進行。
     
    首先取抗凝血按體積比 1:1 的比例加樣本稀釋液(產品編號:2010C1119)混勻,根據
     
    稀釋后的樣本量大小,分以下兩種情況:
     
    情況 A:稀釋后的血液樣本量小于 5ml 時,實驗方法如下:
     
    • 取一支 15ml 離心管,先加入與稀釋后樣本等量的分離液(注:分離液最少不得少于 3ml)。
     
    • 用吸管小心吸取稀釋后的血液樣本加于分離液液面上,600-900g,離心 25-30min(注:根據血液樣本量確定離心條件,血液樣本量越多,離心力越大,離心時間越長,具體離心條件需客戶自行摸索,以達到最佳分離效果)。
     
    • 離心后,此時離心管中由上至下分為四層。第一層為血漿層。第二層為環狀乳白色淋巴細胞層。第三層為透明分離液層。第四層為紅細胞層。
     
    • 用吸管小心吸取第一、二、三層,棄去,在剩余紅細胞層中加入 10ml 清洗液(產品編號:2010X1118),混勻細胞。
    • 250g,離心 10min。
     
    • 棄上清。
     
    • 用吸管以 5ml 清洗液(產品編號:2010X1118)重懸所得細胞。
     
    • 250g,離心 10min。
     
    • 重復 6、7、8,棄上清后以 0.5ml 后續實驗所需相應液體重懸細胞。
     
    情況 B:稀釋后的血液樣本量大于等于 5ml 時,實驗方法如下:
     
    • 取一支適當的離心管,先加入與稀釋后樣本等量的分離液。
     
    • 將經稀釋后的血液樣本小心加于分離液之液面上,650-950g(最大離心力可至 1000g),離心 25-30min。(注:根據血液樣本量確定離心條件,血液量越多,離心力越大,離心時間越長,具體離心條件需客戶自行摸索,以達到最佳分離效果。加入血液樣本后,樣本及分離液總體積不得超過離心管總體積的三分之二)。
     
    • 剩余步驟同“情況 A”中步驟 3 至步驟 10。
     
    【注意事項】
     
    • 全過程樣本、試劑及實驗環境均需在 20±2℃的條件下進行。為獲得最佳的實驗結果,最好在取血 2h 內進行實驗,血液存放時間越長,細胞分離效果越差。血液放置超過 6h 后分離效果更差甚至不能達到分離目的。
     
    • 本實驗最好不要使用高聚合材質(如聚苯乙烯)的塑料制品,應使用無靜電、低靜電離心管及未經堿處理過后的玻璃制品,因為靜電作用將導致細胞貼壁、堿處理的玻璃表面會變成毛面,影響細胞分離效果。
    • 如第一二三層吸不干凈,會導致粒細胞等混雜。
     
    • 如所實驗后細胞得率或活性過低,請聯系技術支持以尋求幫助。
     
    【儲存條件及有效期】
     
    常溫保存,有效期 2 年。本品易感染細菌,需無菌條件操作。無菌條件下操作,啟
     
    封后置常溫保存。如 4℃保存,本分離液易出現白色結晶,影響分離效果。
     
    【參考值(參考范圍)】
     
    本實驗紅細胞提取率及純度均大于 80%。
     
    下表為成年人外周血中各種細胞的數量及比例,用戶可適當進行參考。
     
      紅細胞   白細胞   血小板
               
        (4.0-10.0)×109  
    含量(個/L) (4.0-5.5)×1012 中性粒細胞 淋巴細胞 單核細胞 (1.0-3.0)×1011
        50%-70% 20%-40% 3%-8%  
               
     
    【相關實驗技術方案】
     
    • 流式細胞技術。
     
    • 免疫組化技術。
     
     
    【可能存在的問題及解決方法】
     
    • 本分離液分離細胞的原理為密度梯度離心,其密度與溫度、大氣壓等密切相關。不同地區客戶可根據當地情況對離心條件進行適當調整。建議對離心條件進行調整時,恒定離心時間,對離心轉速進行調整。
     
    • 本分離液依照國際標準,全部使用藥用級原料,性能指標與國產同類產品略有不同,可
     
    能出現紅細胞沉降不完全的情況,可以適當加大離心轉速。
     
    注:在對離心條件進行調整時,離心轉速的加減以 50-100g 為基數,直至達到最佳分離效果,
     
    離心力最小不得小于 400g,最大不得大于 1200g。離心時間以 20-30min 為準。
     
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